GME検査室の検査方法のご紹介｜第三回
【ECLIA法】について

ECLIA法は測定原理の一つであり、日本語では電気化学発光免疫測定法といいます。ECLIAは「エクリア」と読みます。
体を守る働きをする『抗体』と、人体への侵入者である病原菌などの『抗原』があります。
その2つが反応する『抗原抗体反応』を利用した免疫学的検査の一つがECLIA法です。
基本的には抗原と抗体は決まった組み合わせでしか反応しませんので、例えば抗新型コロナウイルス抗体がインフルエンザウイルスと反応することはありません。この決まった組み合わせでしか反応できないことを利用し、目的の抗体や抗原を検出しています。
この抗原抗体反応に加え、電気エネルギーによる発光を用いた測定方法がECLIA法となります。

検体中の測定対象を抗原とする場合について話を進めます。（測定対象が抗体の場合は、抗原と抗体が逆になります）

第三反応

第三反応として、第二反応と同様にB/F分離を行い、純粋に第二反応で形成したサンドイッチ結合物のみを残します。
これに電極上で電気エネルギーを加えるとサンドイッチ結合物のルテニウムが発光します。この発光量が検体中の抗原量を反映します。この発光のメカニズムは酸化還元反応を利用しています。

この第一反応から第三反応までがECLIA法の基本原理となります。

弊社で使用している試薬はこの原理を応用した測定方法になりますので、反応の流れが若干異なります。弊社で使用している試薬では第一反応として、測定対象となる抗原に反応するビオチン化抗体、ルテニウム標識抗体を反応させます。
【ビオチン化抗体―抗原―ルテニウム標識抗体】といった結合物が出来上がります。

第二反応として、ストレプトアビジンコーティング磁性マイクロパーティクル（ＳＡ磁性ＭＰ）という試薬を反応させます。
この試薬はアビジンと非常によく似た性質を持つ『ストレプトアビジン』という物質で覆われている、磁気を帯びた粒子です。この反応でビオチンとストレプトアビジンが非常に強く結合します。
【ＳＡ磁性ＭＰ―ビオチン化抗体―抗原―ルテニウム標識抗体】といった結合物が出来上がります。
この結合物を磁力により電極に引きつけ、更にB/F分離を行い、未反応物質を除去します。
【電極｜ＳＡ磁性ＭＰ―ビオチン化抗体―抗原―ルテニウム標識抗体】
ここに電気エネルギーを加え、発光量を測定することにより、検体中の抗原量を測定することができます。

一般的には様々なタンパク質を測定可能であり、腫瘍マーカーやホルモンなど数多くの項目で実施されています。
弊社の検査項目でECLIA法にて測定しているのは、HBｓ抗原、抗HCV抗体、HIV（抗HIV抗体及びｐ24抗原）、抗TP抗体、NT-proBNP、抗コロナウイルス抗体の6項目になります。